下面是小编为大家整理的重复字数,(11),供大家参考。
1 1 引 言
鹿茸是吉林长白山主要生产的 3 种著名中药材之一，近
50 60 年来人参的化学和药理学研究成果已为其临床应用奠定了夯实的基础。
鹿茸作为临床治疗药物在我国已有几千年的悠久历史，但鹿茸的化学成分和药理学研究远不如人参那样深入和广泛，其作为中药资源至今还未得到科学的利用和开发。
这是因为长期以来人们一直未从鹿茸中找到其特有的生物活性物质，因此无法明确其切实的适应症和建立明确的鹿茸制剂质量标准。鹿茸迅速生长的生物学特征使人们意识到，鹿茸中有可能存在促进上皮、骨骼、血管以及神经等组织快速生长的生物活性物质。
目前已经知道的促进细胞和组织生长的生物活性物质大多多为蛋白质以及多肽类，而鹿茸中蛋白质及多肽的生物含量高达 百分之五五以上。
因此，从鹿茸多肽类物质中寻找和发现其特有的生物活性物质将成为鹿茸研究领域的新热点。为进一步有效确定鹿茸多肽组分中发挥生物效应物质的功能与结构，人们逐步开始从鹿茸中分离单体活性多肽。
1.1 鹿茸多肽
鹿茸中含有大量的氨基酸、无机盐、脂类物质、蛋白质和糖类化合物等成分。截至到目前研究发现多肽、蛋白质在生命活动中起着至关重要的作用，在鹿茸的药用功能中占有极其重要的地位，是鹿茸的主要药效成分之一。鹿茸为常用滋补保健中药，主要具有温肾壮阳强筋健骨、益精补血、温肾壮阳等功效[1] 。鹿茸中含有大量的无机元素、氨基酸、蛋白质、脂类物质和糖类化合物等有效成分。截止到目前为止研究发现蛋白质、多肽在生命活动中起着至关重要的作用，在鹿茸的药用功能中占有极其重要的地位，是鹿茸的主要药效成分之一。随着人们对鹿茸研究的深入，人们已经开始大力重视鹿茸中具有生物活性的蛋白质和多肽即生长因子的研究。鹿茸多肽是从鹿茸中提取的一种多肽类生物活性因子，为鹿茸的主要生物活性成分，由 39 个氨基酸组成，分子量为 7.2kDa。本文将着重于研究鹿茸多肽对记忆认知障碍的影响与功效。
1.2 认知 障碍
认知是机体认识和获取知识的智能加工过程，涉及学习、记忆、语言、思维、精神、情感等一系列随意、心理和社会行为。认知障碍指与上述学习记忆以及思维判断有关的大脑高级智能加工过程出现异常，从而引起严重学习、记忆障碍，同时伴有失
2 语或失用或失认或失行等改变的病理过程。认知的基础是大脑皮层的正常功能，任何引起大脑皮层功能和结构异常的因素均可导致认知障碍。由于大脑的功能复杂，且认知障碍的不同类型互相关联，即某一方面的认知问题可以引起另一方面或多个方面的认知异常（例如，一个病人若有注意力和记忆方面的缺陷，就会出现解决问题的障碍）。因此，认知障碍是脑疾病诊断和治疗中最困难的问题之一。随着全球人口老龄化严重加剧，其发病率呈逐渐增高趋势，为患者家庭带来严重负担。中医认为认知障碍发病本质为本虚标实，气血阴阳衰少，病理产物大量堆积而致，治疗应采用补肾益智、益气活血、开窍等方法。鹿茸多肽对神经系统有较大影响作用，能起到较好治疗和缓解作用。
3 1.3 认知障碍 动物 模型的造模方法
记忆和学习是两个有联系的神经过程[2] 。记忆则是学习到的信息存储和“读出”的神经活动过程。学习指人和动物获得外界知识的神经活动过程。两者互为依赖，学习是记忆的前提，而新的学习又常常在己获得的记忆的基础上进行的。根据信息论的观点[3-4] ，记忆分为三个阶段，即学习记忆的获得、记忆的巩固和记忆的再现。东莨菪碱、亚硝酸钠、乙醇分别对记忆的三个环节可以进行阻断，进而制造了认知功能障碍的动物模型。这些化学药品所致认知障碍动物模型，具有记忆损害确实、损害环节明确、造模方法简单等优点，被大量广泛应用于益智药物的筛选中。
4 1.4 认知 障碍 的研究 方法
中医药认为认知障碍是肾精亏虚,
气血不足, 痰瘀阻滞, 髓海失养
, 脑络不充,
灵机失用,
发为痴呆.
因而在治疗上多采用补肾填精,
补益气血,
活血化瘀,
化痰散结等方法治疗,
实验研究表明,
中医药在不同程度上对认知障碍的治疗具有积极有效地作用：模型鼠脑组织 SOD、乙酰胆碱脂酶活性降低,
脂褐质含量减少[3] ,
清除 MDA、自由基等毒性物质、增强 SOD 的活性、改善血液流变性和微循环 [6] ,
降低脑内 NO、NOS、MAO 和 AchE 的含量[7] 等.
研究发现中药通过降低脑组织内 Glu 含量,
抑制小鼠缺血脑组织中 Glu 的释放,
降低其兴奋性,
从而保护神经元[8] ,
降低造模大鼠血清中 IL-6、TNF-α 含量,
对改善认知障碍大鼠神经变性[9] ,
抑制大鼠海马 CA1 区神经细胞的凋亡[10] .
改善全血黏度及红细胞指数,脑灵汤降低高、
3 中、低切全血黏度及血浆黏度、刚性指数、红细胞聚集指数、红细胞压积[11] ,
可能是其改善痴呆认知和记忆障碍的作用机制.
5 1.5 鹿茸多肽的研究现状
从 20 世纪 30 年代开始，前苏联、韩国和日本对鹿茸成分进行了初步粗略的研究。近些年来，中国对鹿茸多肽的研究也有一些报道，人们已开始重视对鹿茸中具有生物活性的蛋白质物质和多肽的研究[12] 。张志强等 [13] 从鹿茸中纯化出了分子量为7.2kDa 以上的多肽。霍玉书等[14] 采用无菌采采茸冷冻、干燥、缓冲液提取和分子筛分离得到分子量在 1000 以上的蛋白质多肽类物质。董万超等[15] 将梅花鹿二杠茸用百分之四十的乙醇回流提取、丙酮分级沉淀、 离心分离 、SephadexG-25-50 柱层析纯化得梅花鹿多肽Ⅰ和 Ⅱ 组分，测定了 IR 和 UV 的 光谱。生物效应实验表明，组分Ⅰ 和 Ⅱ 均具有促生长、抗炎作用。
王本祥等[12] 对于鹿茸多肽活性的研究较为深入，近些年来，他们的实验室在该方面取得了许多重大的研究新成果。于 1996 年首次从鲜梅花鹿茸中分离获得了具有很强的促进骨和软骨细胞增殖的低分子量生物活性物质的有效部位[16.17] 。在此基础上，采用凝胶过滤层析、离子交换层析以及高效液相方法，从马鹿鲜茸中分离得到 1 个分子量为 3216Da 的纯多肽。周秋丽等研究从鹿茸中提取的分子量分别为 3.6kDa、7.2kDa、11.4kDa 的多肽；同时，周秋丽等[18.19] 比较了梅花鹿茸多肽和马鹿茸多肽化学组成及生物活性差异，通过激光飞行时间质谱及蛋白质电泳等手段进一步发现二者在多肽的组成上是有很大差别的。从电泳图谱中可以看到，梅花鹿茸多肽的 2 条主要电泳区带分布在低分子量区域，分子量为 1000~3000Da 东北马鹿茸多肽呈现明显的3 条多肽区带，分子量范 1000~9000Da，为阐明梅花鹿茸和马鹿茸这两种不同来源的鹿茸活性成分和分子结构的差别奠定了基础。
6 1.6 学习记忆障碍的发生机制
学习和记忆是大脑的高级功能之一,同时学习和记忆又是两个不同又很密切联系的神经生物活动过程。简单的来说,学习是指经验的获得或发展;记忆是指经验的储存和再现。它们都是建立在条件反射基础上的大脑活动,两者相辅相成,密不可分。人类随着
4 年龄的不断增长,细胞逐渐衰老,器官功能逐渐减退,大脑的老化也日益明显,认知障碍正是大脑衰老的具体表现之一。认知障碍的发生可由多种原因引起,其机理涉及多系统多因素,是极为复杂的机制,至今学术界对其认识也未完全统一。
2 实验部分