下面是小编为大家整理的核酸扩增及产物分析标准操作程序（精选文档）,供大家参考。
核酸扩增及产物分析标准操作程序
一、目的：
规范 PCR 实验室对标本检测的核酸扩增及结果定量分析的标准操作的全过程，以保证实验结果的准确性。
二、适用范围：
临床基因扩增检验实验室的检测标本。
三、职责：
由临床基因扩增检验实验室专业技术人员制定程序文件，实验室负责人审核，科室主任批准实施。
四、程序：
1、本实验室所用核酸扩增方法为 PCR 法。
2、核酸的提取，按“标本的处理标准操作程序”进行。
3、PCR 试剂的准备，按所用试剂说明配制，同时做试剂空白对照。
4、在加样区将模板加入反应管中，同时做阴、阳性及空白对照，在 PCR 扩增区扩增，PCR 仪按“仪器设备的标本操
作程序”操作。
5、产物分析方法为实时荧光定量，所用仪器为 ABI-5700，扩增完成后进入分析窗口分析结果。
6、基线的确定：取 3～8 或 3～9 个循环的荧光信号。
7、阈值的设定：原则以基线刚好超过正常阴性对照扩增曲线的最高点为准
8、质控标准：
1）、四个阳性参控品的 Ct 值都应小于 28。标准曲线的拟和度应大于等于 0.990，否则视为定量结果无效。
2）、阴性对照、空白对照的扩增曲线应平坦，否则结果无效。
9、结果判断：
1）、检测标本中核酸阳性时，按实际结果报告。
2）、检测标本中用此方法检测为阴性时，均报告为<试剂最底检出下限。
3）、对可疑结果应待查，需要时与临床联系。
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