刘艳丽，李 静，于 彬，李 瑾，柴 梅，李沧友
(沧州市第三医院 1.供应室;2.肝病科,河北 沧州061000)
乙型肝炎病毒(HBV)感染呈世界性流行，是目前世界范围内的主要公共卫生问题之一[1]。全球约有3.5亿慢性乙型肝炎病毒感染者，每年有100多万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和肝癌，严重危害大众身心健康，对患者造成痛苦，也对医疗资源造成极大消耗[2-3]。慢性乙型肝炎(CHB)的发病与细胞因子关系密切，而辅助性T细胞(Th)是分泌产生细胞因子的主要细胞之一，分为Th1和Th2两个亚群[4]。近年研究发现，Th1/Th2平衡是维持正常免疫功能所必需的，机体对HBV的免疫应答失衡是CHB及其重症化的重要发生机制之一，因而研究HBV感染时Th1/Th2状态对认识乙型肝炎重症化发病、发展、预后评估中的作用逐渐引起重视[5-6]。本研究探讨Th1/Th2细胞因子在预测HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者短期预后的价值，现报道如下。
1.1 研究对象
采用回顾性分析法，病例纳入时间为2021年1月至2021年12月，共有69例HBV-ACLF患者入组本研究。纳入标准：①诊断符合2018年《肝衰竭诊治指南》[7]中ACLF诊断标准；
CHB诊断参照2019年《慢性乙型肝炎防治指南》[8]，并通过 HBV 血清学检查、HBV DNA 定量、实验室指标等检查确诊；
②年龄>18岁，有HBV感染史，首次发病；
③意识、认识及精神正常；
④自愿配合并签定知情同意书；
⑤研究方案经我院医学伦理委员会批准同意。排除标准：①依从性差，不能配合研究者；
②恶性肿瘤、合并免疫系统疾病或其他嗜肝病毒感染者；
③脂肪肝或药物性肝炎；
④严重肝、肾、心功能衰竭或其他严重原发性疾病者。HBV-ACLF组男41例，女28例，年龄26-65岁，平均年龄(48.14±6.35)岁；
肝衰竭分型：早期36例，中期21例，晚期12例；
既往病史：高血压53例，2型糖尿病45例，冠心病29例。CHB组70例，男43例，女27例，年龄24-66岁，平均年龄(49.03±6.18)岁；
既往病史：高血压49例，2型糖尿病40例，冠心病24例。同期健康者70例，其中男40例，女30例，年龄24-65岁，平均年龄(49.11±6.22)岁。
1.2 HBV-ACLF组分期标准
早期：无顽固性的腹水，血肌酐水平正常，凝血酶原活动度(PTA)31%-40%；
中期：PTA 21%-30%，无顽固性的腹水，血肌酐上升<正常范围的10%；
晚期：PTA≤20%，有顽固性腹水、消化道出血，血肌酐>1.5 mg/dL。
1.3 HBV-ACLF组不同预后
根据患者 3 个月后的病情转归情况分组，其中病情好转出院或者病情得到稳定控制的患者分为生存组，病情恶化死亡的患者为死亡组。
1.4 方法
采集各组对象第2 d晨起空腹血样本5 ml，凝聚2 h后，将血液样本上离心机进行离心处理，转速为 3 500 r/min，时间15 min，完成后收集上层血清储存于-80℃ 的冷冻箱中准备检测。应用Roche cobas8000 原装配套试剂检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)及总胆红素(TBiL)水平。采用电化学发光法记录乙肝表面抗原(HBeAg)阳性情况，定量 PCR 法检测血清 HBV DNA 定量水平；
应用ELISA法检测Th1细胞因子[血清白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)]、Th2细胞因子[IL-4、IL-6、IL-10]水平进行比较，整个操作过程应实施无菌操作，严重按照试剂盒(雅酶生物技术有限公司)说明书中方法操作，确保检测质量。
1.5 统计学处理
2.1 三组对象血清Th1/Th2型细胞因子水平比较
HBV-ACLF组患者血清IL-2、INF-γ、TNF-α、IL-6高于对照组及CHB组，IL-4、IL-10低于对照组及CHB组(P<0.05)，见表1、表2。
表1 三组对象血清Th1细胞因子水平比较
表2 三组对象血清Th2细胞因子水平比较
2.2 不同病情程度HBV-ACLF患者血清Th1/Th2型细胞因子水平比较
随着病情的加重，INF-γ、TNF-α、IL-6水平升高(P<0.05)，IL-4、IL-10水平下降(P<0.05)，IL-2水平无显著变化，见表3、表4。
表3 不同病情程度HBV-ACLF患者血清Th1型细胞因子水平比较
表4 不同病情程度HBV-ACLF患者血清Th2型细胞因子水平比较
2.3 不同预后HBV-ACLF患者血清Th1/Th2型细胞因子水平比较
生存组INF-γ、IL-6、TNF-α水平低于死亡组(P<0.05)，IL-4、IL-10水平高于死亡组(P<0.05)，IL-2水平无显著变化，见表5、表6。
表5 不同预后HBV-ACLF患者血清Th1型细胞因子水平比较
表6 不同预后HBV-ACLF患者血清Th2型细胞因子水平比较
2.4 血清Th1/Th2型细胞因子和HBV-ACLF患者预后的Logistic回归分析
将血清 INF-γ、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10作为自变量，将是否死亡作为因变量，经过 Logistic 回归分析显示，血清INF-、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10水平是影响HBV-ACLF患者预后的独立危险因素(P<0.05)，见表7。
表7 血清Th1/Th2型细胞因子和HBV-ACLF患者预后的Logistic回归分析
据统计，亚洲国家中约 70%以的ACLF病人是由HBV感染所诱发，寻找一种有效评估ACLF病人病情与预后的可靠指标在挽救患者生命，改善预后方面发挥极重要作用[9-10]。HBV-ACLF的诱发因素较多，发病机制复杂，其中细胞因子参与ACLF的发生与发展。
近年来，Th1/Th2细胞因子动态变化在乙肝肝衰竭病情发展中的作用逐渐引起重视[11,12]。Th1细胞主要包括IFN-γ、TNF-α和IL-2等因子，主要参与机体细胞免疫反应与迟发性超敏反应。IFN-γ是可以有效反映Th1细胞功能的因子，其不仅参与病原体的清除，还可以募集下游的免疫活性细胞参与机体的免疫反应。IFN-γ除了在CHB中可以促进下游免疫效应细胞的增殖，刺激细胞活化外，还在ACLF发病中发挥免疫扩大效应[13]。IL-2是重要的免疫增强因子，能够激活T细胞，刺激 T细胞增殖，IL-2水平在一定程度上反映了细胞的免疫功能状态[14]。TNF-α是典型的炎症反应因子，是诱导肝细胞坏死的最直接因子[15]。Th2细胞主要分泌IL-4、IL-6、IL-10，能够辅助B细胞分化为抗体分泌细胞，抑制Th1 型细胞因子的产生，并介导体液免疫。Th2免疫占优势时，可以导致病毒感染的慢性化。
本研究显示，HBV-ACLF组患者血清IL-2、INF-γ、TNF-α高于对照组及CHB组(P<0.05)，且随着病情的加重，INF-γ、IL-6水平升高，IL-4、IL-10水平下降。同时生存组INF-γ、IL-6、TNF-α水平低于死亡组，IL-4、IL-10水平高于死亡组。且血清INF-γ、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10水平是影响HBV-ACLF患者预后的独立危险因素(P<0.05)，显示出Th1/Th2细胞因子动态变化在HBV-ACLF患者的发生和发展过程中均具有重要作用，通过分析是由于有以下原因：和CHB与健康对照组对比，HBV-ACLF存在着肝脏损伤现象，肝细胞处在严重的炎症反应与应激反应的状态下，进而细胞因子被大量释放，肝细胞受损程度加重，阻断肝细胞再生，形成恶性循环，且在病情较重及死亡的患者中，肝细胞损害程度和肝脏组织会发生重构及纤维化，细胞核与线粒体的正常生理功能受到严重伤害，这一过程也进一步刺激了细胞因子的表达[17-18]。这此本研究认为，通过了解HBV-ACLF患者基线Th1/Th2细胞因子的水平有助于判断ACLF病人的短期预后，在今后的临床中，也可考虑动态监测Th1/Th2细胞因子的表达来判断预后，尤其是监测血清INF-γ、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10水平变化在指导临床用药上也具有积极意义。但本研究尚存在一定的不足，仅观察了基线血清INF-γ、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10水平的表达，未详细探讨其在对 HBV-ACLF诊断中的应用价值，且样本量偏少，未来也需进一步深入研究。
猜你喜欢肝细胞乙型肝炎细胞因子外泌体miRNA在肝细胞癌中的研究进展昆明医科大学学报(2022年2期)2022-03-29抗GD2抗体联合细胞因子在高危NB治疗中的研究进展现代临床医学(2021年4期)2021-07-31慢性乙型肝炎的预防与治疗中国医药指南(2017年3期)2017-11-13急性心肌梗死病人细胞因子表达及临床意义中西医结合心脑血管病杂志(2016年20期)2016-03-01肝细胞程序性坏死的研究进展癌变·畸变·突变(2016年3期)2016-02-27肝细胞癌诊断中CT灌注成像的应用探析哈尔滨医药(2015年4期)2015-12-01细胞因子在慢性肾缺血与肾小管-间质纤维化过程中的作用医学研究杂志(2015年12期)2015-06-10中西医结合治疗慢性乙型肝炎肝纤维化66例中国中医药现代远程教育(2014年13期)2014-03-01SIAh2与Sprouty2在肝细胞癌中的表达及临床意义河南医学研究(2014年5期)2014-02-27细胞因子在抗病毒免疫中作用的研究进展现代检验医学杂志(2014年1期)2014-02-06