李 惠
(大连市现代农业生产发展服务中心，辽宁大连 116000)
大菱鲆(Scophthalmusmaximus)是中国北方主要的海水养殖鱼类之一，属于鲽型目，鲆科、菱鲆属。它天然分布于大西洋东侧欧洲沿岸，自北欧南部直至北非北部均有分布，黑海和地中海也有分布，主要分布还是北海和黑海西部沿岸。全部欧洲和西亚沿岸年总捕捞量不超过1万吨。同时，大菱鲆身体扁平近似圆形，双眼位于身体左侧，有眼侧呈褐色，有点状黑色素和少量皮刺，无眼侧光滑呈白色，背鳍与臀无硬棘，头部及尾鳍均较小，身体中部肉厚，内脏团小，全部身体的可食用部分比牙鲆多。当前随着养殖的规模化、集约化，养殖密度逐渐增大，致使大菱鲆机体的免疫力下降，频发疾病[1]。过去养殖生产中，经常使用抗生素类药物预防治疗养殖疾病，但饲料端抗生素的禁用，寻找安全、高效、绿色、低残留、无耐药性的饲料添加剂迫在眉睫。其中，中草药具有来源广泛、天然、安全、绿色的特点被研究者广泛研究与关注[2]。中草药具有药理与营养的双重作用，作为饲料添加剂不仅可以为动物机体提供营养，还能预防治疗一些疾病[3]。研究表明，复方中草药制剂可以有效抑制大菱鲆养殖中的源哈维氏弧菌[3]。郭萍萍等[4]研究表明，在大菱鲆养殖中使用0.05%的中草药制剂可以有效提高大菱鲆机体的生长性能。但目前，关于中草药制剂在大菱鲆机体非特异性免疫功能方面的研究结果甚少。因此，该试验以大菱鲆为研究对象，探究不同剂量的中草药制剂对其机体非特异性免疫力的影响，并确定中草药制剂在大菱鲆生产中的最适添加水平，为中草药制剂在大菱鲆生产中的科学、合理推广与应用提供数据参考。
1.1 中草药制剂
该研究使用的中草药制剂由党参(Codonopsispilosula)、茯苓(Wolfiporiacocos)、甘草(GlycyrrhizauralensisFisch)、五倍子(RhuschinensisMill.)和生姜(ZingiberofficinaleRoscoe)组成，各组分的比例为6∶3∶2∶1∶1，购自大连当地中药材市场，以上5种中草药粉碎后，过40目筛，备用。
1.2 大菱鲆
该研究选取大小均匀、健康的大菱鲆，体重为(20.10±0.05)g，由大连水产养殖集团有限公司提供。
1.3 试验方法
试验选择120尾体重相近、健康的大菱鲆按照单因素试验设计，分成4组，每组30尾大菱鲆。对照组大菱鲆投喂基础饲料，试验1组大菱鲆投喂基础饲料+0.5%的中草药制剂，试验2组大菱鲆投喂基础饲料+1.0%的中草药制剂，试验3组大菱鲆投喂基础饲料+1.5%的中草药制剂。试验周期为4周。试验结束检测各组大菱鲆血清非特异性免疫指标。试验大菱鲆的基础饲料原料构成和营养成分含量见表1。
表1 试验大菱鲆的基础饲料原料构成和营养成分含量
1.3 大菱鲆日常养殖管理
正式试验开始前，所有大菱鲆放在水族箱中驯养14d，适应环境后进行正式试验。养殖期间，大菱鲆每日投喂2次饲料，分别在早上8:30和晚上18:00投喂，投喂量约为大菱鲆体重的2.5%。每日换水量约为1/3。24hrs供氧，水温约为16℃，pH值约为8.2，溶解氧大于7mg/L，氨氮含量小于0.5mg/L。
1.4 检测指标
试验结束后，每组挑选10尾大菱鲆采集尾静脉血液，4000转离心5mins后，收集上层血清用于检测溶菌酶、免疫球蛋白M、补体C3、补体C4、过氧化氢酶等指标。检测方法参考南京建成生物工程研究所的试剂盒说明书。
1.5 数据分析
大菱鲆非特异性免疫指标数据采用SPSS26进行显著性及两两比较分析，P<0.05表示数据差异显著。
不同剂量的中草药制剂对大菱鲆机体非特异性免疫指标的影响见表2，由表2数据可知，试验2组大菱鲆血清中的溶菌酶、补体C3和过氧化氢酶水平显著高于对照组(P<0.05)，而试验1组和试验3组大菱鲆血清中的溶菌酶、补体C3和过氧化氢酶水平有比对照组提高的趋势，但未达到显著性水平(P>0.05)。结果表明，在大菱鲆生产中使用1.0%的中草药制剂可以有效提高大菱鲆机体的非特异性免疫功能。
表2 不同剂量的中草药制剂对大菱鲆机体非特异性免疫指标的影响
鱼类机体中的非特异性免疫系统是其抵御病原微生物入侵的第一道防线，其功能的强弱关系鱼类机体的健康状态及生长性能。中草药中含有多种生物活性成分，如生物碱、多酚、黄酮及氨基酸等，可以通过调节动物机体的免疫功能促进机体生长发育。该试验中，试验2组大菱鲆血清中的溶菌酶、补体C3和过氧化氢酶水平显著高于对照组，试验1组和试验3组大菱鲆血清中的溶菌酶、补体C3和过氧化氢酶水平有提高的趋势，但未达到显著性水平，结果表明，在大菱鲆生产中使用1.0%的中草药制剂可以有效提高大菱鲆机体的非特异性免疫功能，但中草药制剂的添加量不易过大，添加量过高导致机体免疫力略微降低，可能是超出了大菱鲆机体的耐受力。高学政等[5]等研究发现，在大菱鲆饲料中添加1.0%的中草药制剂可以有效提高血清中溶菌酶活性及补体C3含量，且改善了大菱鲆的增重率、特定生长率、饵料系数、肝体比、脏体比等生长性能数据。中草药制剂改善鱼类机体的免疫功能与其富含的活性成分有关，中草药中的生物活性成分可以提高鱼类机体内吞噬细胞的功能，提高杀菌能力，抵抗细菌、病毒等对机体的危害，提高鱼类机体的抗应激能力及抗病力，改善机体健康，进而提高机体的免疫功能。
该试验条件下，在大菱鲆养殖生产中使用适量的中草药制剂可以提高大菱鲆血清中溶菌酶、补体C3和过氧化氢酶水平，提高了机体的非特异性免疫功能，且中草药在大菱鲆饲料中的最适添加水平为1.0%。
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