刘 璨 张怡航 崔世豪 李龙城 王 岩 范贝贝 陈 清*
(1 中国农业大学资源与环境学院,农田土壤污染防治与修复北京市重点实验室,北京 100193;
2 赤峰市农牧科学研究所,内蒙古赤峰 024000)
2014 年发布的《全国土壤污染状况调查公报》显示(https://www.mee.gov.cn/gkml/sthjbgw/qt/201404/t20140417_270670.htm),我国农业土壤重金属污染的点位超标率达19.4%,其中镉(cadmium,Cd)居第1 位(7.0%),占土壤重金属污染超标点位的43.0%。土壤中的Cd 易被作物根系吸收并转移到地上部分,进而通过食物链积累威胁人类健康(张静 等,2015;
张辉 等,2022),因此对农田土壤Cd 污染的控制十分重要。
常用的Cd 污染农田土壤安全利用技术措施包括原位钝化、农艺调控、水肥管理和低Cd 积累品种替代种植等(黄道友 等,2018;
高宝林 等,2021)。近年来,许多学者根据农作物对Cd 的耐受性和积累特征,因地制宜筛选出油菜(张洋 等,2017)、小麦(李乐乐 等,2019)、玉米和水稻(董欣欣 等,2021)等适合在中、低Cd 污染程度农田种植的低Cd 累积农作物品种,可最大程度降低污染土壤修复成本并保证农业可持续生产(黄志亮,2012;
黄道友 等,2018)。部分学者在京津冀地区也开展了低Cd 积累叶菜类蔬菜的筛选工作。任艳军等(2019)对比了冀东地区14 种叶菜类蔬菜对土壤中Cd 吸收和累积能力的差异,筛选出了茴香、普通白菜、茼蒿、韭菜低Cd 积累品种。不同种类、不同品种的叶菜类蔬菜对Cd 胁迫的反应存在明显差异(Rizwan et al.,2017)。何飞飞和杨君(2011)研究表明,当土壤Cd 含量达到0.516 mg·kg-1时,供试普通白菜(小白菜)品种Cd 超标率达11.1%,且部分品种产量降低。此外,不同大白菜品种对Cd 胁迫的反应亦有较大差异。陈辰等(2020)研究发现,20 个大白菜品种对于Cd 的耐受性有明显差异;
当土壤Cd 含量为1.20 mg ·kg-1时,超过95%的供试大白菜品种生物量降低50%,仅金峰保持较高生物量,且其叶片中Cd 累积量最低,说明金峰对Cd 的耐受性明显强于其他品种。郑爱珍和徐心诚(2007)比较了12 个大白菜品种在Cd 胁迫下的地上部生物量,结果表明先锋夏王、夏抗50 具有较高的Cd 耐性。因此,系统性地比较不同叶菜类蔬菜品种对Cd 的累积能力,对于今后在京津冀地区开展安全种植具有重要意义。
本试验通过盆栽方式比较了京津冀市场上15个大白菜品种对Cd 富集能力的差异,明确不同大白菜品种对Cd 的累积风险差异;
基于地上部Cd积累量筛选Cd 低积累大白菜品种,合理调整大白菜生产布局,以期为京津冀地区大白菜的合理、安全种植提供参考。
1.1 试验材料
参试大白菜品种为京津冀市场上常见的15 个品种:11S-2 白菜、14CR-2 白菜、15-13 白菜、16-7 白菜、17-23、18-20、19-2、5-126 白菜、CR京秋新3 号、北京桔红心、改良京春白、京春娃3号、京翠60、京夏56 号、小杂60 号,均购自京研益农(北京)种业科技有限公司。
试验土壤采集自河北省沧州市Cd 污染地块。取0~20 cm 表层土,混合均匀后按四分法取足够土壤,带回农田土壤污染防治与修复北京市重点实验室自然风干,挑出石块、植物根系等杂物,使用研钵研磨后过2 mm 尼龙筛备用;
另取其中部分土壤过0.15 mm 尼龙筛,参照鲍士旦(2000)的方法测定土壤基础理化性质和总Cd 含量,土壤DTPA 提取态Cd 含量测定方法:在100 mL 离心管中加入5.00 g 土样和25 mL DTPA 浸提液(pH 值7.30),25 ℃、180 r·min-1条件下振荡2 h,然后离心过滤,利用火焰原子吸收分光光度计测定滤液中的Cd 浓度。本试验采集土壤的总Cd 含量1.45 mg·kg-1,DTPA 提取态Cd 含量0.750 mg·kg-1,有机质含量18.3 g·kg-1,全氮含量3.0 g·kg-1,速效磷含量171.0 mg·kg-1,速效钾含量388.0 mg ·kg-1,EC 值538.0 μS·cm-1,pH 值7.33。
1.2 试验方法
采用室内盆栽方式,于2021 年6 月20 日至7月15 日在中国农业大学西校区的温室开展。共设置16 个处理,即15 个大白菜品种和1 个空白处理,每处理3 次重复,每重复4~6 株,完全随机摆放。
将1 000 g 风干、过2 mm 筛的Cd 污染土壤装入内径14.5 cm、高14 cm 的塑料盆中,每盆播种20 粒。供试土壤的肥力水平能够满足大白菜短期生长的养分需求,因此没有施用基肥;
田间持水量保持在65%。幼苗长出第3 片真叶后间苗,每盆保留生长势一致的幼苗4~6 株。播种后20~25 d,植株生长趋于缓慢,虽然还未结球,但已达到可食用阶段,因此在播种后25 d 采收,参照高鑫等(2020)的方法测定地上部鲜、干质量及Cd 含量(FW)。大白菜采收后,收集土样并风干后过2 mm 筛,参照鲍士旦(2000)的方法测定土壤总Cd 含量,并计算大白菜Cd 生物富集系数(BCF)。
1.3 数据处理
试验数据采用Excel 2013、SPSS Statistics 软件进行统计、作图及方差分析,运用最小显著性差异法(LSD)进行多重比较(P<0.05);
采用系统聚类法进行聚类分析。
2.1 镉胁迫下不同大白菜品种地上部生物量差异分析
从表1 可以看出,播种后25 d 京翠60 的地上部鲜质量最高,为14.17 g·株-1;
其次是CR 京秋新3 号和京夏56 号,分别为12.84 g·株-1和12.18 g·株-1;
鲜质量最低的是15-13 白菜,只有9.17 g ·株-1;
参试15 个大白菜品种中,京翠60 地上部鲜质量显著高于小杂60 号、京春娃3 号、北京桔红心、14CR-2 白菜、11S-2 白菜、15-13 白菜、19-2、16-7 白菜等品种。
表1 镉胁迫下不同大白菜品种的地上部生物量
从表1 还可以看出,京翠60 和17-23 属于高生物量大白菜品种,京翠60 地上部干质量显著高于除17-23 外的其余13 个品种,是地上部干质量最低的16-7 白菜的1.56 倍;
CR 京秋新3 号、小杂60 号、京夏56 号、18-20、京春娃3 号、北京桔红心、14CR-2 白菜、5-126 白菜、改良京春白、11S-2 白菜属于中等生物量大白菜品种,地上部干质量在0.53~0.61 g·株-1之间,品种间无显著差异;
15-13 白菜、19-2 和16-7 白菜属于低生物量大白菜品种,地上部干质量分别为0.52、0.51、0.48 g·株-1,显著低于京翠60 和17-23。
以上结果表明,参试15 个大白菜品种的地上部生物量存在显著差异。除了不同品种本身的差异外,对Cd 胁迫的响应差异可能也是导致生物量差异的原因之一(柴冠群 等,2022)。
2.2 镉胁迫下不同大白菜品种地上部Cd 累积能力差异分析
从表2 可以看出,不同大白菜品种的Cd 累积能力存在显著差异,京翠60、京夏56 号地上部Cd含量较高,分别为0.169、0.163 mg·kg-1(FW),显著高于其他品种;
14CR-2 白菜、16-7 白菜地上部Cd 含量较低,分别为0.004、0.011 mg·kg-1(FW),京翠60 地上部Cd 含量是14CR-2 白菜的42.25 倍。参试15 个大白菜品种的地上部Cd 含量范围为0.004~0.169 mg·kg-1(FW),均低于GB2762—2017《食品安全国家标准 食品中污染物限量》规定的0.20 mg·kg-1(FW)。
表2 镉胁迫下不同大白菜品种的地上部Cd 富集能力
生物富集系数(BCF)是评价植物从土壤中累积重金属能力的重要指标之一。从表2 可以看出,不同大白菜品种的Cd 富集能力差异显著,15 个大白菜品种的BCF 范围为0.003~0.117,波动较大,其中京翠60 和京夏56 号Cd 富集能力较强,BCF 分别为0.117 和0.113,显著高于其他品种;
14CR-2 白菜、16-7 白菜的BCF 较小,分别为0.003、0.008。
综上,14CR-2 白菜可作为低Cd 累积大白菜品种在轻中度Cd 污染土壤上推广种植。
2.3 聚类分析
对15 个大白菜品种的Cd 富集能力进行聚类分析(图1),结果分为2 个类群:第1 类群包括11S-2 白菜、改良京春白、17-23、北京桔红心、CR京 秋 新3 号、14CR-2 白 菜、16-7 白 菜、18-20、19-2、5-126 白菜和京春娃3 号,为Cd 中低累积类群;
第2 类群包括京翠60、京夏56 号、15-13白菜、小杂60 号,为Cd 高累积类群。
图1 15 个大白菜品种Cd 生物富集系数聚类分析结果
Cd 在环境中有较强的移动性,易被植物吸收并积累到不同部位,且在植物中的积累及分布因品种而异,故不同品种对Cd 的富集能力存在显著差异(杜志鹏 等,2018;
郭雄昌 等,2022),进而对作物生长以及人体健康产生不同程度的危害,所以在进行品种选育、推广种植时应充分考虑不同品种对于Cd 累积能力的差异性(刘峰 等,2017;
郑龙,2021)。在实际生产中,选择低Cd 累积能力的大白菜品种可保障食品安全,降低Cd 通过食物链进入人体的风险。对于轻中度Cd 污染土壤,通过筛选低Cd 积累品种进行替代种植,实现安全生产。
本试验结果表明,参试15 个大白菜品种的地上部Cd 含量均在安全范围内,但是品种间存在显著差异,表明大白菜是对Cd 较为敏感的作物。聚类分析结果表明,京翠60、京夏56 号、15-13 白菜、小杂60 号为Cd 高累积类群,其地上部Cd 含量范围为0.115~0.169 mg·kg-1(FW),相比于Cd中低累积类群(地上部Cd 含量范围为0.004~0.092 mg·kg-1,FW)存在较高的安全风险;
14CR-2白菜地上部Cd 含量以及BCF 最低,其对土壤中的Cd 积累能力明显低于其他品种,建议推广种植。
研究表明,不同品种Cd 含量差异可能是由于各类抗氧化酶的活性存在差异。例如,闫雷等(2021)研究表明低Cd 积累大白菜品种叶片的过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)等抗氧化酶的活性显著高于高Cd 积累品种。另一方面,Cd 转运蛋白基因的表达差异可能也是导致Cd 积累能力差异的重要原因。研究表明,Nramp 蛋白家族主要参与二价金属阳离子转运的过程(Bozzi &Rachelle,2021),HMA 蛋白家族主要通过ATP 酶水解释放的能量对金属离子进行吸收转运(Cellier et al.,1994)。闫雷等(2021)证实高Cd 积累品种中与自然抗性相关的巨噬细胞蛋白(Nramp2.1、Nramp4.2)、重 金 属ATP 酶(HMA2、HMA4)等Cd 转运蛋白的基因相对表达量高于低Cd 积累品种。陈可欣(2019)验证了黄瓜在Cd 胁迫环境下CsNramp4和CsHMA2的表达与地上部和根部Cd 含量相关,其中CsNramp4可能与根部吸收积累Cd 的过程相关,CsHMA2可能在Cd 从根部向地上部运输的过程中发挥至关重要的作用。因此,抗氧化酶活性差异以及Cd 转运蛋白基因表达差异可能是造成大白菜不同品种Cd 积累能力不同的主要原因,后续将对大白菜植株内各金属转运蛋白进行研究,深入了解大白菜富集Cd 在分子层面的差异,对筛选低Cd 积累大白菜品种提供指导方向。
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